無菌室定義

無菌室一個應用行業非常廣泛的基礎性配套產業，在電子信息、半導體、光電子、精密制造、醫藥衛生、生物工程、汽車噴涂等眾多行業均有應用，并根據行業的精密與無塵要求，等級差別也較大。

另外對級別要求較高的是生化實驗室和高精納米材料生產車間，物聯網芯片的發展將是未來需求的一大方向。

隨著電子元器件向微小化方向發展，液晶面板已經升級至八代，行業需求非常巨大。

無菌室的要求

1.工作室應矮小、平整，面積只需4米2左右，高2.2-2.3米，內部裝修應平整、光滑，無凹凸不平或棱角等，四壁及屋頂應用不透水之材質，便于擦洗及自凈

2.室內采光面積大，從室外應能看到室內情況。

3.為保證無菌室的潔凈，無菌室周圍需設緩沖走廊，走廊旁再設緩沖間，其面積可小于無菌室。

4.無菌室、緩沖走廊及緩沖間均設有日光燈及供消毒空氣用紫外燈，自凈紫外燈離工作臺以1米為宜 ，其電源開關均應設在室外。

5.無菌室與緩沖間進出口應設拉門，門與窗平齊，門縫要封緊，兩門應錯開，以免空氣對流造成污染。

6.無菌室的使用與管理

(1) 無菌室應保持清潔整齊，室內僅存放必須的檢驗用具如酒精燈、酒精棉、火柴、鑷子、接種針、接種環、玻璃鉛筆等。&不要放與檢測無關的物品

(2) 室內檢驗用具及凳桌等保持固定位置，不隨便移動。

(3) 每2-3周用2%石炭酸水溶液擦拭工作臺、門、窗、桌、椅及地面，然后用3%石炭酸水溶液噴霧消毒空氣，zui后紫外燈自凈半小時

(4) 定期檢查室內空氣無菌狀況，細菌數應控制在10個以下，發現不符合要求時，應立即*消毒自凈。/無菌室無菌程度的測定方法:取普通肉湯瓊脂平板、改良馬丁培養基平板各3個(平板直徑均9厘米)，置無菌室各工作位置上，開蓋曝露半小時，然后倒置進行培養，測細菌總數應置37℃溫箱培養48小時;測霉菌數則應置27℃溫箱培養5天。細菌`霉菌總數均不得超過10個為 。

(5) 無菌室自凈前，應將所有物品置于操作之部位(待檢物例外)，然后打開紫外燈自凈30分鐘，時間一到，關閉紫外燈待用

(6) 進入無菌室前，必須于緩沖間更換消毒過的工作服、工作帽及工作鞋。

(7) 操作應嚴格按照無菌操作規定進行，操作中少說話，不喧嘩，以保持環境的無菌狀態。

器材及場所的自凈消毒

微生物檢驗用器材及場所必須進行自凈或消毒處理，不同的對象采用不同的處理方法

1. 高壓蒸汽自凈: 工作服、口罩、稀釋液等，置高壓自凈鍋內，一般采用121℃自凈半小時,當然不同的培養基有不同的要求,應分別處理

2. 火焰自凈:接種針、接種環等可直接火焰自凈

3. 高溫干燥自凈: 各種玻璃器皿、注射器、吸管等，置于燥箱中160℃自凈2小時

4. 一 般消毒: 無菌室內的凳、工作臺、試管架、天平、待檢物容器或包裝均無法進行自凈，必須用其他方法進行消毒處理，采用2%石炭酸或來蘇兒水溶液擦拭消毒，工作人員的手也用此法進行消毒

5. 空氣的消毒: 開啟紫外燈照射30-60分鐘 即可。

操作要領

準備工作

1. 行無菌室空間的消毒，開啟紫外燈30-60分鐘

2. 檢驗用的有關器材， 搬入無菌室前必須分別進會自凈消毒

3. 操作人員必須將手清洗消毒，穿戴好無菌工作衣、帽和鞋，才能進入無菌室

4. 進入無菌室后再一次消毒手部，然后才進行檢驗操作

操作過程注意事項

1. 動作要輕，不能太快，以免攪動空氣增加污染;玻璃器皿也應輕取輕放，以免破損污染環境

2. 操作應在近火焰區進行。

3. 接種環、接種針等金屬器材使用前后均需灼燒，灼燒時先通過內焰，使殘物烘干后再灼燒自凈

4. 使用吸管時，切勿用嘴直接吸、吹吸管，而必須用洗耳球操作。

5. 觀察平板時不好 開蓋，如欲沾取菌落檢查時，必需靠近火焰區操作，平皿蓋也不能 大開，而是上下蓋適當開縫。

6. 進行可疑致病菌涂片染色時，應使用夾子夾持玻片，切勿用手 直接拿玻片，以免造成污染，用過的玻片也應置于消毒液中浸泡消毒，然后再洗滌。

7. 工作結束，收拾好工作臺上的樣品及器材，zui后用消毒液擦拭工作臺。

空氣凈化

無菌室空氣凈化工程是屬于生物凈化工程的一種，一般無菌室要求的潔凈度為萬級，標準的微生物檢測實驗室都會專門開辟5~8個平方出來建造無菌室，無菌室只要夠放置實驗室樣品及必需的設備即可，面積無需過大而造成浪費，面積過大對于做無菌室空氣凈化工程來說不僅僅是提高建造成本而已，日后的運行及維護費用也會高的令人驚訝。一般微生物檢測按照實驗室行業要求都需要在無菌室中進行，很多食品菌、微生物等都是在超凈工作臺中完成檢測和化驗的。

隨著社會科技發展，越來越重視食品安全問題，無菌室空氣凈化工程也在不斷的普及。有了無菌室凈化工程，將超凈工作臺放置于無菌室內操作，使實驗環境更加潔凈，實驗樣品不易于被污染。

無菌室內配置了百級超凈工作臺也并不是所有細菌都可以進行實驗的，一般常規的菌落總數、微生物培養、血細胞培養、研究、干細胞研究、大腸菌等實驗可以在百級超凈臺進行。但是如果需要做致病細菌，為了達到保護實驗室人員的安全問題，就必須得建造生物安全實驗室，使用生物安全柜進行實驗。該類實驗不能在普通的無菌實驗室中進行。

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